蔡教授微生物診斷真有趣

CAMP vs. Reverse CAMP vs. CAMP inhibition

          進行臨床微生物診斷，傳統上，CAMP試驗用於決定β溶血型鏈球菌產生CAMP因子(Factor)的能力，若某菌株能產生CAMP因子，將可與產生β溶血素(β-hemolysin，β-lysin)金黃色葡萄球菌在含有綿羊血紅血球培養基上之接種直角交界處(兩菌相距5~7 mm)發生加強溶血現象(於培養在35℃的嗜氧或5%CO₂環境)，例如β溶血型鏈球菌中的B群鏈球菌(Streptococcus agalactiae)即為CAMP陽性。CAMP試驗或反應係根據研究者Christie, Atkins, and Munch-Peterson所陳述的加強溶解現象。加強溶血一般呈火箭形或圓形。

          後來CAMP反應用到其它菌的測試，利用能產生β溶血型李斯特氏菌(Listeria)與產生β溶血素(β-hemolysin，β-lysin)金黃色葡萄球菌在含有綿羊血紅血球培養基上的接種直角交界處(兩菌相距5~7 mm)發生加強溶血現象(培養在35℃的嗜氧環境)。李斯特氏菌中，Listeria monocytogenes (＋), Listeria seeligeri (＋), Listeria ivanovii (－), Listeria innocua (－), Listeria welshimeri (－)。另外，利用能產生β溶血型李斯特氏菌(Listeria)與能產生β溶血的Rhodococcus equi進行測試，同樣地，在含有綿羊血紅血球培養基上之接種直角交界處(兩菌相距5~7 mm)發生加強溶血現象(於培養在35℃的嗜氧環境)。李斯特氏菌中，Listeria monocytogenes (－), Listeria seeligeri (－), Listeria ivanovii (＋), Listeria innocua (－), Listeria welshimeri (－)，因此以Rhodococcus equi進行測試所獲得的CAMP陽性為鑑定Listeria ivanovii之專一性標記(marker)。

        後來在1980年代，一些研究者利用能產生CAMP因子的B群鏈球菌與能產生α溶血素(α-hemolysin，α-toxin)的Clostridium perfringens (氣性壞疽梭狀芽孢桿菌)在厭氧BAP劃線接種(呈直角，兩菌相距1~2 mm)，培養在35℃的厭氧環境，同樣地，在接種的交界處發生加強溶血現象，此稱為Reverse CAMP(反CAMP試驗)陽性，其為Clostridium perfringens (氣性壞疽梭狀芽孢桿菌)之特徵。加強溶血陽性呈火箭形，而呈子彈形則為反應不定(＋/－)。Clostridium perfringens的加強溶血係因為產生Phospholipase C (lecithinase)而可水解lecithin (卵磷脂)，sphingomyelin (鞘磷脂)，cephalin (腦磷脂)。

        此外Reverse CAMP試驗亦用於Arcanbacterium菌種的區分，其中Arcanbacterium haemolyticum (CAMP＋)與Arcanobacterium pygenes (CAMP－)及Arcanobacterium bernardiae (CAMP－)之區分。

        另外一個用在測定棒狀桿菌產毒素菌株(Phospholipase D產生株)的Reverse CAMP試驗，又稱為CAMP抑制試驗(inhibition test)，其所顯現的溶血型與傳統的CAMP反應相反，也就是說，傳統的B群鏈球菌測定，CAMP反應陽性是加強溶血，而棒狀桿菌的Reverse CAMP反應則為抑制溶血。因此研究者將此種Reverse CAMP試驗稱為CAMP抑制試驗(inhibition test)。主要用於區分Corynebacterium pseudotuberulosis (＋) Corynebacterium ulcerans (＋)與其它 Corynebacterium spp. (－)。另外，Arcanbacterium haemolyticum亦為Phospholipase D產生株。

         從參考文獻看來，Reverse CAMP之定義依研究者而有不同解讀，當以厭氧菌Clostridium perfringens操作Reverse CAMP是以產生β溶血的S. agalactiae代替S. aureus。CAMP及Reverse CAMP兩者之陽性反應都是加強溶血。因此，兩種Reverse CAMP的定義似乎因研究者及用在哪一種菌的測定而有不同的解讀。至於測定棒狀桿菌產生Phospholipase D之Reverse CAMP，則因為呈現抑制溶血現象，因此又稱為CAMP inhibition(抑制)試驗。

          詳細內容請參閱第十版臨床微生物診斷學(2011年)第610，682，718及1173頁。